Epi口服 Histoloy New

Epi牙龈 Histology New

明升88的外表皮和外表皮组织由正常的人类口腔上皮细胞组成. 这些细胞经过培养形成了多层细胞, 高度分化的模型的人颊(表口)和牙龈(表口)表现型. 组织培养在特殊制备的细胞培养皿中使用无血清培养基,并在体外细胞培养技术的前沿达到分化水平. 表口和表龈组织模型表现出与活体相似的形态和生长特征,具有一致性和高度可重复性.

图1:细胞角蛋白K13和K14的免疫染色:A)口腔外膜和B)牙龈外膜.
图1:细胞角蛋白K13和K14的免疫染色:A)口腔外膜和B)牙龈外膜.
图2:人β防御素(HBDs) ORL-200组织免疫染色.
图2:人β防御素(HBDs) ORL-200组织免疫染色.
图3:人β防御素(HBDs)的GIN-100组织免疫染色.
图3:人β防御素(HBDs)的GIN-100组织免疫染色.

Epi口服和Epi牙龈在除最顶端外的各层均表达细胞角蛋白K13,在组织上层弱表达细胞角蛋白K14(图1). 这些组织还会产生天然的抗菌肽,称为人体防御素(HBDs). Epi口服构成表达hdd -1和hdd -3,但不表达hdd -2(图2). Epi牙龈在除最上层和顶端各层均弱表达hdd -3和hdd -1,不表达hdd -2(图3).

表1为外植体组织及Epi牙龈 (GIN-100)和Epi牙龈 (ORL-200)的脂质分析.  外周口腔和颊部外植体只含有神经酰胺2(神经酰胺NS).  外龈和牙龈组织含有神经酰胺1, 2, 3(也称为神经酰胺EOS, NS, and EOHP/NP, respectively).

越来越多的数据表明,Epi口服和Epi牙龈有效地提供了一种廉价的, 非动物指的是评估口腔刺激, toxicology, and pathology-related issues.  十二烷基硫酸钠(SDS)作用的代表性剂量-反应曲线, 牙膏中常用的表面活性剂, is shown in Figure 4.

 

图4:暴露1小时后,SDS溶液(40L)对Epi口服 (ORL-200)组织活力的影响. SDS的浓度选择在牙膏中正常存在的范围内(0.0 – 3.0%).

 

表1:体内和体外组织脂质分析. 在体颊和牙龈值是14个组织样本的平均值. 体外组织值来自同一批次.

表1:体内和体外组织脂质分析. 在体颊和牙龈值是14个组织样本的平均值. 体外组织值来自同一批次.

粘膜和牙龈刺激

使用直接的MTT法或市售的ELISA试剂盒检测口腔或牙龈上皮组织活力和细胞因子释放, 几天内就能得到确切的结果.

Epi口服 & Epi牙龈刺激协议

口服 Irritation Reference

Drug Delivery

Epi口服和Epi牙龈在确定最终制剂在体外的吸收潜能方面是有用的.

Epi口服 Absorption Protocol

Epi牙龈药物吸收方案

口服 Drug Delivery Reference

Model for 口服 Pathologies

口腔念珠菌病已被用于研究口腔念珠菌病, oral mucositis, 以及口腔黏膜的抗菌特性.

口服 Candidiasis Publication

口服 Mucositis Publication

口服抗微生物肽出版物

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组织:

包: Epi牙龈 (ORL-200)和Epi牙龈 (GIN-100)包由24个组织组成. ORL-606和GIN-606包由6个组织组成. Tissue kits contain tissues, culture medium, 平衡组织,培养24小时, and plasticware.  请联系明升88了解特定的套件内容.

Substrate: ORL-200和GIN-100:使用胶原蛋白涂层,9 mm ID单孔组织培养插入物. Pore size = 0.4 µm, Inner Diameter = 0.875 cm. Surface area = 0.6 cm2. ORL-606和GIN-606:单孔组织培养插片. Pore size = 0.4 µm, Inner Diameter = 2.5 cm. Surface area = 4.2 cm2.

文化: At air-liquid interface.

Histology: ORL-200:非角化组织的8-11个细胞层. GIN-100: 8-11层角化组织.

Lot Numbers: 每周生产的组织批号被分配一个特定的批号. 所有的组织包在很多是相同的细胞, medium, 处理, culture conditions, 等.

装运: 4℃,培养基中添加琼脂糖凝胶.

Shipment day: 周一.

交付: 周二上午,通过联邦快递优先服务(美国). 美国以外:周二-周四,视地点而定.

Shelf life: 包括运输时间在内,组织在使用前可在4°C下储存72小时. 但是,除非绝对必要,否则不建议延长储存时间. In addition, 如果组织在同一天一致使用,可获得最佳的重现性, e.g. 周三早上,在4°C存放一夜之后.

Length of experiments: 可继续培养至少1周,正常形态保持良好. 培养物必须每隔一天用5.0毫升维护介质(ORL-200-MM或GIN-100-MM). 细胞培养插入物放置在6孔板上的培养架(MEL-STND)或垫圈(EPI-WSHR)上,以允许使用5.0 ml.

Alternative tissues:

ORL-300-FT: Full thickness ORL-200.   在含有牙龈成纤维细胞的胶原基质上培养的口腔上皮组织.

ORL-300-FT-LC: ORL-300-FT包含朗格汉斯细胞.

GIN-300-FT: Full thickness GIN-100.  在含有牙龈成纤维细胞的胶原基质上培养的牙龈上皮组织.

细胞:

Epi口服

类型: 正常人类口腔角化细胞(NHOK)分化为非角化组织, buccal phenotype, part number ORL-200.

Genetic make-up: Single donor.

Derived from: Non-diseased, 从接受拔牙手术的病人或尸体上获得的成人口腔组织. 组织是用来自无吸毒史或口腔病理的非吸烟者的细胞制造的.

Screened for: 艾滋病毒,乙型肝炎,丙型肝炎,支原体,细菌,酵母,真菌.Epi牙龈

Alternate donors available. 可使用有吸烟史患者的细胞生产Epi口服 (ORL-200-D2).  

Epi牙龈

类型: 正常人类口腔角化细胞(NHOK)分化为角化组织, gingival phenotype, part number GIN-100.

Genetic make-up: Single donor.

Derived from:

Non-diseased, 从接受拔牙手术的病人或尸体上获得的成人口腔组织.  标准组织是由来自无吸毒史或口腔病理的非吸烟者的细胞产生的.

Alternate donors available.  Epi牙龈使用来自有吸烟史的患者的细胞生产(GIN-100-D2).  

Screened for: 艾滋病毒,乙型肝炎,丙型肝炎,支原体,细菌,酵母,真菌.

介质:

Epi口服 &Epi牙龈

Base medium: 杜尔贝科改良Eagle中型(DMEM)

Growth factors/hormones: 表皮生长因子及其他专有因子

血清: 没有一个

Antibiotics: Gentamicin 5 µg/ml

Anti-fungal agent: Amphotericin B 0.25µg / ml

pH Indicator: Phenol red

Other additives: Proprietary

Alternatives: 无酚红,无抗生素,抗真菌的培养基和组织是可用的. 代理在发货前3天被移除

Maintenance medium: ORL-200-MM or GIN-100-MM

质量控制和无菌:

Visual inspection: 所有组织都要进行肉眼检查,如果发现有物理缺陷, 组织被拒绝装运.

End-use testing:. Tissues are also exposed to 1.用MTT法测定不同时间的Triton X-100,以及将组织活力降低到50% (ET-50)所需的暴露时间.  QC规格:ORL-200: 34.85 < ET-50 < 105.78 min GIN-100:  5.47 hr < ET-50 < 10.42 hr.

Sterility: 在整个生产过程中使用的所有介质都要进行无菌检查. 维持培养基加或不加抗生素孵育1周,并检查无菌. 用于运输的24孔板上的琼脂糖凝胶也要培养一周,并检查任何污染的迹象.

Screening for pathogens: 所有的细胞都经过PCR检测,HIV、乙肝和丙肝均呈阴性. 然而,没有一种已知的测试方法可以完全保证细胞是无病原体的. 因此, 这些产品和所有人类衍生产品应按照CDC-NIH手册中建议的BSL-2级别(生物安全级别2)或更高级别处理, “微生物和生物医学实验室的生物安全,” 1998. 如需进一步帮助,请联系您的现场安全主任或明升88技术服务.

Notification of lot failure: 如果一个组织批次没有通过我们的质量控制或无菌测试, 我们会通知客户,并在适当的时候免费更换纸巾. 因为我们的一些QC和无菌测试是在出货后进行的, 我们会尽快通知你. 一般情况下,ET-50故障会在周四5点前通知.m.; sterility failures will be notified within 8 days of shipment.

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